細胞室規章

『壹』 細胞培養室要求空氣潔凈度達到什麼等級

細胞培養室要求空氣潔凈度達到3A等級。

根據空氣潔凈度的不同，無菌室可分為哪幾個級別一般情況下，無菌室的等級有百級，千級，萬級，十萬級，百萬級等等。
凈化等級一般分為100級、1000級、10000級、100000級，現在2010年版的GMP 凈化車間已經不用這個叫法了，分為ABCD級別，分別相對應於98版的幾個級別，通過檢測區域內的塵埃粒子數、浮游菌數、沉降均數評價凈化級別，各個級別 有不同的要求，凈化等級分靜態、動態兩種。

『貳』 細胞培養室常用的消毒方法有哪些

一般情況下，細胞培養室都用無菌實驗室。

配製過氧乙酸作為消毒劑。實驗室常備84或者潔爾滅作為消毒用葯。

實驗室安裝紫外燈。安全櫃里也要有紫外。沒有的話可以去買手持的那種。實驗室用完後開紫外照半個小時。覺得有必要的話還可以用甲醛熏蒸一天...這個比較麻煩...

實驗器具專櫃放置。

實驗用過的槍頭，針筒，廢液什麼的在安全櫃里直接丟進過氧乙酸裡面浸泡半小時後棄去。

接觸病毒的可回收的用具一定要包起來（槍一般不用，盡量不要碰到病毒液就可以了）取出安全櫃後高滅。

（搞個大點的滅菌鍋吧...要不然苦死了...)

垃圾專門收集。如果後勤不能處理的要自己滅菌後丟棄。

做實驗一定要在2級以上安全櫃里。做的時候下面墊多些草紙。有條件的可以墊鋁箔紙什麼的，那個不透水。

實驗室嚴格控制人員流動！！！能打疫苗(vaccine)的打疫苗(vaccine)。

穿好防護衣物，保護自己也是保護他人！！！

還有就是，千萬不要戴著手套出實驗室！！！！！

具體可以參考國外關於生物安全實驗室的規章制度。因自己的條件實施。

在下拙見...

『叄』 細胞培養實驗室的設置應該怎麼布置

組織細胞培養技術與其他一般實驗室工作的主要區別在於要求保持無菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。目前，超凈工作台的廣泛使用，很大程度上方便了組織細胞培養工作，並使一些常規實驗室有可能用於進行細胞培養。細胞培養實驗室應能進行六方面的工作：無菌操作、孵育、制備、清洗、消毒滅菌處理、儲藏。1．無菌操作區（1）無菌操作室：無菌操作區只限於細胞培養及其他無菌操作的區域，最好能與外界隔離，不能穿行或受其他干擾。理想的無菌操作室應劃為三部分：a) 更衣室—―供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。b) 緩沖間—―位於更衣間與操作間之間，目的是為了保證操作間的無菌環境，同時可放置恆溫培養箱及某些必需的小型儀器。c) 無菌操作間—―專用於無菌操作、細胞培養。其大小要適當，且其頂部不宜過高（不超過2.5m）以保證紫外線的有效滅菌效果；牆壁光滑無死角以便清潔和消毒。工作台安置不應靠牆壁，檯面要光滑壓塑作表面，漆成白色或灰色以利於解剖組織及酚紅顯示pH的觀察。無菌操作間的空氣消毒：紫外線燈—－產生臭氧，並且室內溫度及濕度均較高，不利於工作人員健康。空氣過濾的恆溫恆濕裝置—－最好。表1 潔凈室（區）空氣潔凈度級別表潔凈度級別 塵粒最大允許數／立方米 微生物最大允許數 浮游菌／立方米 沉降菌／皿100級 3,500 0 5 110000級 350,000 2,000 100 3100000級 3,500,000 20,000 500 10300000級 10,350,000 60,000 - 15無臭氧紫外線消毒器電子消毒滅菌器—－在高壓電場作用下，電子管的內外電極發生強烈電子轟擊，使空氣電離而將空氣中的氧轉換成臭氧。臭氧是一種強氧化劑，能同細菌的胞膜及酶蛋白氫硫基進行氧化分解反應，從而靠臭氧氣體彌漫性擴散達到殺菌之目的，消毒時沒有死角。消毒後空間的殘留臭氧只需30～40min即能自行還原成氧氣，空氣不留異味，消毒物體表面不留殘毒。（2）凈化工作台：操作簡單，安裝方便，佔用空間小且凈化效果很好。一般細菌培養室使用的凈化工作台主要有兩種：a)側流式或稱垂直式 b)外流式或稱水平層流式。凈化工作台工作原理（大致相同）—－通常是將室內空氣經粗過濾器初濾，由離心風機壓入靜壓箱，再經高效空氣過濾器精濾，由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風速通過無菌區，從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環境。側流式工作台—－空氣凈化後的氣流由左或右側通過工作檯面流向對側，也有從上向下或從下向上流向對側，形成氣流屏障保持工作區無菌。工作台結構為封閉式。外流式（水平式）工作台—－凈化後的空氣面向操作者流動，因而外方氣流不致混入操作，但進行有害物質實驗操作則對操作者不利。工作台結構為開放式（已少用）。 樓主有空的話可以自己去生物幫那裡查找一下這方面的信息，我在那裡看到過這方面的介紹，挺全面的有空的話可以去 www.bio1000.com/zt/cell/45828.html 那裡看看，應該會有幫助的。

『肆』 幹細胞實驗室建設，有哪些標准規范

SICOLAB喜格（實驗室規劃設計）整理如下：
一、通用標准
1、GB 19489-2008實驗室生物安全通用要求
2、GB 50346-2011 生物安全實驗室建築技術規范
3、JGJ91-2019 科研建築設計標准
4、GB50073-2013 潔凈廠房設計規范
二、主要標准
1、幹細胞臨床研究管理辦法(試行)
2、幹細胞制劑制備質量管理自律規范（中國醫葯生物技術協會）
3、SZDB188-2016 細胞制備中心建設與管理規范
4、GB∕T 37864-2019 生物樣本庫質量和能力通用要求
5、SZDB/Z 126-2015人 類間充質幹細胞庫建設與管理規范
6、SZDBZ 266-2017 綜合細胞庫設置和管理規范
7、DB31T979-2016臨床組織工程技術平台基本要求

『伍』 醫院的細胞室是做什麼的

武漢協和醫院幹細胞中心科室
醫生數量：3人
科室醫生 ：李欣 王萍 黃士昂
明天是周四，應該是王萍大夫坐診

『陸』 什麼是細胞室，細胞室管理及設置規范

細胞培養室要求空氣潔凈度達到3A等級。
根據空氣潔凈度的不同，無菌室可分為哪幾個級別一般情況下，無菌室的等級有百級，千級，萬級，十萬級，百萬級等等。
凈化等級一般分為100級、1000級、10000級、100000級，現在2010年版的GMP 凈化車間已經不用這個叫法了，分為ABCD級別，分別相對應於98版的幾個級別，通過檢測區域內的塵埃粒子數、浮游菌數、沉降均數評價凈化級別，各個級別 有不同的要求，凈化等級分靜態、動態兩種。

『柒』 細胞培養的具體步驟和要求以及注意事項

一、細胞復甦

將凍存細胞從液氮中取出後，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移人15ml離心管中，加入10ml預熱的DMEM完全培養基，輕輕吹勻，離心，2000rpmX2min，棄上清液。

加入10ml DMEM培養基清洗，棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基，輕輕吹打，接種於10cm盤中，在含5%CO2的細胞培養箱中培養。

二、細胞傳代

細胞密度達到80%~90%時．去培養基，10ml PBS清洗2次。加入3ml含0．25%EDTA的胰蛋白酶，放人細胞培養箱3min。加人1ml DMEM完全培養基終止胰酶消化，轉移至15ml離心管。

加入10ml PBS清洗細胞培養盤，轉移至15ml離心管，2000rpmX2min，棄上清液。再加入10ml PBS（經高壓滅菌，保存於40C），吹勻，吸取10微升進行計數，按照1×106/盤接種，在含5%CO2的細胞培養箱繼續培養。

三、細胞凍存

細胞密度達到80%～90%時，去培養基，10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶，放人細胞培養箱3min。加入lmlDMEM完全培養基終止胰酶消化，轉移至15ml離心管。加入10ml PBS清洗細胞培養盤，轉移至15ml離心管，2000rpmX2min，棄上清液。

加入lml凍存液（90%血清，10%DMSO），放入凍存盒內（盒內有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入一80℃冰箱內，過夜，第二天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個月。

凍存液的配製：70%的完全培養基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加，邊滴邊搖。

注意事項

（1）進入細胞間開始細胞培養時，必須嚴格按照下列步驟操作：

①確定所有的細胞操作用的溶液和耗材都已經消毒並檢測沒有問題，不確定的溶液和耗材請勿使用，除非特殊情況，不要借用別人的溶液。

②確定衣服的袖口已經捲起或者白大褂的袖口已經扎緊。

③確定酒精燈內的酒精量，需要的話及時進行補充。

④確定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。為了方便單手開啟瓶蓋，實驗開始前可以把所有瓶蓋旋松。

⑤盡量不要直接傾倒溶液，除非瓶口沒有被燒壞。如果傾倒失敗，溶液粘在瓶口，請用噴過75%酒精的紙巾仔細清潔瓶口周圍（不要接觸到瓶口）後在火焰上簡單燒灼。

⑥操作時如果不能肯定所用的耗材是潔凈的，必須及時更換。

⑦實驗完畢及時收拾，保持工作區域清潔整齊，最後用75%酒精清潔檯面。

（2）細胞污染的預防

①實驗用品防止污染。細胞培養所用試劑、耗材、器材的清洗、消毒要徹底，各種溶液滅菌要仔細，並在無菌實驗檢測陰性後才能使用。操作室及剩餘的無菌器材要定期清潔、消毒、滅菌。

②操作過程防止污染。

③穿著容易起靜電或吸附灰塵的衣物必須更換為白大褂後才能進入細胞間。

④實驗開始前需要確定戴的手套沒有問題，只要接觸過生物安全櫃之外的物品，必須及時對手套進行消毒。

⑤進入細胞培養間後關好門，坐下來盡量少走動以免影響生物安全櫃的風簾。工作開始前要先用75%酒精棉球擦手和瓶蓋。事先要嚴格檢查所用的器材、溶液和細胞，不要把污染品或未經消毒的物品帶入無菌室內，更不能隨便使用，以免造成大規模污染。

⑥細胞操作時動作要輕，必須在火焰周圍無菌區內打開瓶口，並將瓶口放在火焰周圍簡單轉動燒灼，注意不要讓火焰把塑料瓶口燒化。

⑦實驗操作時生物安全櫃的隔板要盡可能放低，盡量減少談話，打噴嚏或咳嗽時絕對不能對著工作區，以免造成不必要的污染。

⑧瓶蓋應當倒放在遠離自己的地方，以避免瓶蓋被誤操作所污染。

⑨不要從敞開的容器口上方經過，以避免衣服上掉落不明物體對細胞的污染。

⑩實驗操作時要注意及時更換巴斯德吸管、移液槍槍頭和移液管，切勿一根管子做到底。一旦發現接觸了非潔凈或者無法確定潔凈的物品必須直接丟棄。實驗完畢應及時收拾，保持實驗室清潔整齊，最後用75%酒精清潔檯面。

（3）防止細胞交叉污染

①在進行多種細胞培養操作時，所用器具要嚴格區分，最好作上標記便於辨別。按順序進行操作，一次只處理一種細胞，多種細胞多種操作一起進行時易發生t昆亂。

②在進行換液或傳代操作時，粘有細胞的移液槍頭和移液管不要觸及試劑瓶瓶口，以免把細胞帶到培養基中污染其他細胞。

③所有細胞一旦購置，或從別處引入，或自己建立，必須及時保種凍存，一旦發生污染可重新復甦細胞，繼續培養。

(7)細胞室規章擴展閱讀：

細胞培養（cell culture）是指在體外模擬體內環境（無菌、適宜溫度、酸鹼度和一定營養條件等），使之生存、生長、繁殖並維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養也叫細胞克隆技術，在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。

不論對於整個生物工程技術，還是其中之一的生物克隆技術來說，細胞培養都是一個必不可少的過程，細胞培養本身就是細胞的大規模克隆。細胞培養技術可以由一個細胞經過大量培養成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞，這是克隆技術必不可少的環節，而且細胞培養本身就是細胞的克隆。

細胞培養技術是細胞生物學研究方法中重要和常用技術，通過細胞培養既可以獲得大量細胞，又可以藉此研究細胞的信號轉導、細胞的合成代謝、細胞的生長增殖等。